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1)在pH值正常范圍內(nèi)(2~8)可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱，具有峰形好，重現(xiàn)性高和壽命長的特點(diǎn)，選用較短的柱子可以提高分離效率，選用較長的柱子可以增加保留，選用小顆粒度的填料可以提高分離度，對分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。2)分離極性大的組分(流動相水相過大)采用AQ類似的色譜柱。3)分離生物堿類的化合物選用經(jīng)過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。4)極端酸性條件下(pH小于2)選用ZorbaxStableBondC18類色譜柱或者寬pH值色譜柱。5)低端...

影響C18色譜柱壽命的幾個(gè)因素主要包含：流動相因素，樣品因素與其他因素。色譜柱使用過程中應(yīng)該注意這些因素，才能有效增加使用壽命。一、流動相因素1、流動相pH不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg/L-1，且在pH1～9的范圍內(nèi)溶解的硅膠量幾乎是常量，考慮到溶解速度的影響，對于硅膠基質(zhì)的填料，其所能承受的流動相pH范圍約為1～8。鍵合相硅膠填料則由于鍵合層的屏蔽作用，使填料對流動相的適應(yīng)范圍大大增加，如現(xiàn)在廣泛使用的反相色譜填料C1...

液相色譜是世界各地實(shí)驗(yàn)室使用的流行純化技術(shù)。如果系統(tǒng)設(shè)置和操作正確，它可以立即從混合物中分離出所需的化合物。學(xué)習(xí)如何使用和制備緩沖液和溶劑是能提高系統(tǒng)性能的重要技巧之一。準(zhǔn)確制備和正確選擇緩沖液對于在液相色譜中獲得可重復(fù)的結(jié)果至關(guān)重要。一、了解您的化合物如果您正在尋找混合物中的特定化合物，您應(yīng)該使用最能將您的分析物與其他分析物分開的緩沖液/溶劑組合。例如，了解極性和溶解度（極性或非極性）、電離、您正在尋找的紫外吸光度將有助于指導(dǎo)您使用特定的色譜柱和溶劑組。二、純度使用較低等級...

本文的重點(diǎn)是快速液相色譜和高效液相色譜。沒有一種完mei的協(xié)議適合每一種分離目的。因此，建議為您的特定應(yīng)用程序優(yōu)化方法。通過本文中列出的建議以及一些前期閱讀和測試，您將輕松純化您正在尋找的組件。一、快速液相色譜純化使用快速色譜法進(jìn)行純化的缺點(diǎn)是該方法固有的分辨率較低。快速液相色譜柱使用更大的粒徑和柱容量，允許使用更多的起始材料，但以分辨率和純度為代價(jià)。如果化合物不需要更高的純度，或者如果下一步將進(jìn)行HPLC，這可能是您的選擇。1、確定溶劑系統(tǒng)樣品的純度（即混合物中有多少化合物...

質(zhì)譜(MS)使研究人員能夠研究許多特性，例如樣品的分子量、結(jié)構(gòu)、特性、數(shù)量和純度。當(dāng)與液相色譜技術(shù)相結(jié)合能成為一種強(qiáng)大的分析工具，能夠從復(fù)雜的生物混合物（如牛奶、血清和全脂）中提取有關(guān)一系列化合物的有意義的數(shù)據(jù)，包括藥物代謝物、肽和蛋白質(zhì)-細(xì)胞裂解物。一、液相色譜與質(zhì)譜在將樣品引入MS儀器之前，通常通過過濾掉顆粒物、濃縮分析物、脫鹽和通常分離出可能導(dǎo)致背景離子或抑制電離的化合物來制備樣品。大多數(shù)情況下，許多或所有這些步驟都是由HPLC、UPLC系統(tǒng)完成的。樣品制備需要對樣品進(jìn)...

分析保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材，使用保護(hù)柱可大大降低分析柱受污染的程度，延長分析柱使用壽命。保護(hù)柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間，作用主要兩方面：1.截留不溶性顆粒2.吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)以下幾種情況建議使用保護(hù)柱：1.中藥、天然產(chǎn)物及合成中間體等基質(zhì)較復(fù)雜的樣品分析——因溶解性差異導(dǎo)致樣品析出而污染分析柱的情況比較嚴(yán)重，梯度洗脫時(shí)影響更大。2.生物樣品分析——因樣品的不可逆吸附導(dǎo)致的污染，保護(hù)柱可先于分析柱承受這種污染，從而延長分析柱壽命。保護(hù)柱很重要，但選擇合適的保護(hù)柱...